Prinsip dan Cara Kerja Spektrofotometer secara Sederhana

Salam dan selamat datang Sobat Sederhana, pada kesempatan kali ini, kita akan membahas tentang spektrofotometer, alat yang sering digunakan di berbagai bidang seperti kimia, biologi, dan farmasi. Spektrofotometer merupakan alat yang digunakan untuk mengukur intensitas cahaya yang melewati suatu sampel. Artikel ini akan menjelaskan prinsip dan cara kerja spektrofotometer secara sederhana kepada Sobat Sederhana.

Prinsip Dasar Spektrofotometer

Prinsip dasar spektrofotometer adalah selalu sama, yaitu mengukur intensitas cahaya yang melewati suatu sampel. Cahaya yang melewati sampel akan diukur dan dibandingkan dengan cahaya referensi. Dengan begitu, kita dapat mengetahui seberapa banyak cahaya yang diserap oleh sampel tersebut. Prinsip ini digunakan untuk mengukur warna pada berbagai benda, seperti kristal, cairan, dan gas.

Perbandingan Cahaya Referensi dan Sampel

Dalam spektrofotometer, cahaya yang dihasilkan oleh sumber cahaya akan dipisahkan menjadi beberapa panjang gelombang. Kemudian, cahaya tersebut akan melewati sampel dan cahaya referensi. Setelah itu, cahaya yang melewati sampel dan cahaya referensi akan dibandingkan menggunakan fotodetektor. Hasil perbandingan tersebut akan ditampilkan dalam bentuk grafik spektrum.

Hasil perbandingan tersebut bergantung pada seberapa besar absorbansi atau transmisi cahaya oleh sampel tersebut. Absorbansi cahaya maksimal jika seluruh cahaya yang diterima oleh sampel terserap oleh sampel tersebut. Sebaliknya, transmisi cahaya maksimal jika seluruh cahaya yang diterima oleh sampel dilewatkan oleh sampel tersebut.

Spektrum Absorbansi

Spektrum absorbansi adalah grafik yang menunjukkan seberapa besar cahaya yang terserap oleh sampel pada tiap-tiap panjang gelombang. Pada grafik tersebut, sumbu x menunjukkan panjang gelombang cahaya, sedangkan sumbu y menunjukkan absorbansi cahaya. Grafik spektrum absorbansi dapat digunakan untuk mengidentifikasi substansi yang terkandung dalam sampel yang diukur.

Absorbansi Sampel

Absorbansi sampel adalah seberapa banyak cahaya yang terserap oleh sampel. Absorbansi sampel diukur dengan mengukur perbedaan cahaya yang dihasilkan oleh sumber cahaya saat melewati sampel dan cahaya referensi. Absorbansi sampel dapat digunakan untuk menentukan konsentrasi sampel.

Cara Kerja Spektrofotometer

Selain memahami prinsip dasar spektrofotometer, Sobat Sederhana juga perlu memahami cara kerja alat ini. Berikut adalah langkah-langkah sederhana penggunaan spektrofotometer:

Persiapan Sampel

Langkah pertama sebelum mengukur spektrum sampel adalah menyiapkan sampel yang akan diukur. Sampel harus bersih dan bening agar intensitas warna dapat terukur. Sampel biasanya diletakkan di dalam kuvet atau cuvette yang terbuat dari bahan kaca atau plastik.

Pemilihan Panjang Gelombang Cahaya

Langkah selanjutnya adalah memilih panjang gelombang yang akan digunakan untuk mengukur sampel. Panjang gelombang yang dipilih bergantung pada absorbansi maksimum sampel. Pilihan penentuan panjang gelombang yang tepat akan memperoleh hasil yang lebih akurat.

Pengukuran Sampel

Setelah sampel dan panjang gelombang dipilih, Sobat Sederhana dapat mengukur intensitas cahaya yang melewati sampel dengan menggunakan spektrofotometer. Setelah itu, hasil pengukuran ditampilkan dalam bentuk grafik spektrum absorbansi.

Kalibrasi Alat

Sebelum menggunakan spektrofotometer, Sobat Sederhana harus melakukan kalibrasi alat terlebih dahulu. Hal ini dilakukan untuk memastikan bahwa spektrofotometer berfungsi dengan baik dan menghasilkan hasil yang akurat. Kalibrasi biasanya dilakukan dengan menggunakan sampel standard yang sudah diketahui konsentrasinya.

Pengolahan Data

Setelah Sobat Sederhana selesai mengukur sampel dengan spektrofotometer, data yang diperoleh perlu diolah agar dapat memberikan makna. Pengolahan data dilakukan dengan menggunakan perangkat lunak khusus yang dapat membantu kita memperoleh kesimpulan dari data hasil pengukuran.

Spektrum Absorbansi Tergantung pada Konsentrasi Sampel

Spektrofotometer dapat digunakan untuk mengukur konsentrasi suatu sampel. Prinsip dasar pengukuran konsentrasi adalah semakin besar konsentrasi sampel, semakin tinggi absorbansi sampel terhadap cahaya yang melewatinya. Dengan begitu, kita dapat menentukan konsentrasi sampel dengan membandingkan absorbansi sampel dengan konsentrasi standar.

Spektrum Absorbansi vs. Konsentrasi Sampel

Spektrum absorbansi yang dihasilkan oleh spektrofotometer tergantung pada konsentrasi sampel. Semakin tinggi konsentrasi sampel, semakin tinggi titik puncak spektrum absorbansi yang dihasilkan. Spektrum absorbansi yang dihasilkan oleh sampel dengan konsentrasi yang berbeda-beda dapat digunakan untuk membuat kurva kalibrasi dan menentukan konsentrasi sampel yang belum diketahui.

Kurva Kalibrasi

Kurva kalibrasi adalah grafik yang menunjukkan hubungan antara absorbansi sampel dengan konsentrasinya dalam larutan. Pembuatan kurva kalibrasi dilakukan dengan mengukur spektrum absorbansi sampel dengan konsentrasi yang berbeda-beda. Kurva kalibrasi dapat digunakan untuk menentukan konsentrasi sampel yang belum diketahui dengan membandingkan absorbansi sampel dengan kurva kalibrasi.

Frequently Asked Questions (FAQ)

Itulah artikel tentang prinsip dan cara kerja spektrofotometer secara sederhana. Semoga artikel ini dapat memberikan pemahaman yang lebih baik tentang spektrofotometer kepada Sobat Sederhana. Jangan lupa untuk terus belajar dan mencari tahu mengenai ilmu pengetahuan yang menarik lainnya. Sampai jumpa di artikel menarik lainnya!

Prinsip dan Cara Kerja Spektrofotometer secara Sederhana